1. 按使用要求在培養操作室內放置測氧儀、除氧催化器及已封閉的培養皿等。500g鈀粒除氧劑（在使用前用干燥箱干燥90分鐘，溫度120min）和500克干燥劑。
2. 按下電源開關，關緊取樣室內、外門，按下真空泵按鈕將取樣室抽成負壓（見真空表指針指向0.08MPa）。
3. 要將培養操作室內的氧氣含量達到極微量狀態，須經10次氣體置換：

（1）*次氣體置換，純度為99.99％的氮氣操作如下：

把乳膠手套套在法蘭圈上并扎緊。隨即踏腳踏開關，讓乳膠手套吸入箱體，達      到充足狀態，松開腳踏開關。

按下箱內氮氣進開關，讓箱內氣壓與外界氣壓一致（乳膠手套稍微往外升一點即可）再按下箱內氮氣進開關，即關閉。

（2）第二次氣體置換（氮氣置換），取樣室先抽真空，并隨即踏腳踏開關，讓乳膠手套吸入箱體，達到充足狀態，松開腳踏開關，重復以上步驟，達到自己所需要的無氧環境。

（3）置換混合氣體，混合氣體配比為：N2↑90%、H2↑5%、CO2↑5%，純度均為99.99％。

• 先將取樣室抽真空，至真空表指針指向0.08MPa。
• 按下箱內混合氣進開關，讓箱內氣壓與外界氣壓一致（乳膠手套稍微往外升一點即可）再按下箱箱內混合氣進開關，即關閉。
• 隨即踏腳踏開關，讓乳膠手套吸入箱體，達到充足狀態，松開腳踏開關
• 按下箱內混合氣進開關，讓箱內氣壓大于外界氣壓（乳膠手套達到充足狀態即可）再按下箱箱內混合氣進開關，即關閉
• 按下箱內混合氣微調開關，使混合氣體按一定的流量充入培養室。

通過換氣后，培養操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。

培養操作室內打開鈀粒除氧劑，按下箱內電源插座，接通除氧催化器電源進行催化除氧。